十月 2006 - 文章

A PhD is not enough!

在这十月的最后一天还是忍不住发一篇,一本朋友推荐的书,虽然自己还没看,但看网上介绍还不错。

可以在我的“个人文件”的电子书目录中下载,同时要配合“小软件”中的一个专门浏览器浏览。

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最近大家不用来看了

又要写申请材料了,申请书和预算书同时写。加上感冒严重,这周是做不了别的事了。
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好久没更新了

先到北京办事,接着参加5天的结构基因组大会,接着回到学校接着参加两天的中法交流会。虽然感受很多,却也还没机会仔细整理,只有慢慢消化,陆续地写出来。

这次大会比两年前的结晶学大会的规格更高了,邀请了各大结构基因组中心的不少大牛。从他们的报告中可以看到近两年结构基因组计划已经得到进一步发展,很多中心的报告都不约而同地用了“high-hanging fruit”这个词(怀疑是PSI的计划书里用的词),都开始花很多精力解决那些difficult target。采用各种筛库的方法进行truncation、mutation;在表达方面也有越来越多的中心使用Cell-free表达系统;膜蛋白、复合物越来越多;在Target的选择上开始细化,比如金属蛋白结构基因组等。

与国外的结构基因组相比,那些high throughput的手段我们是没有了,只有想办法多学习学习技术上的新思路,争取能对自己的课题有所帮助。

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细胞周期调控与共进化的问题

10月4日的《Nature》上有一篇比较有趣的文章《Co-evolution of transcriptional and post-translational cell-cycle regulation》,Nature 443, 594-597(4 October 2006)。作者通过对四个物种——芽殖酵母、裂殖酵母、人和拟南芥的细胞周期相关蛋白的表达模式进行比较研究,发现他们的调控机制是类似的,即及时组装和功能模块的多级调控(just-in-time assembly and multi-layer regulation of functional modules)。该机制的核心是负责调控的亚基是周期性地被转录的,它们在细胞周期中的某个时刻被转录、翻译并被磷酸化,随后与其它蛋白(稳定表达的蛋白)一起形成完整的复合物执行功能,之后被选择性地降解。有趣的是,负责调控的蛋白在不同的物种中并不是保守的,即并不是直系同源(ortholog )的。

从这里我们看到,,对于控制细胞周期的复合物来说,关键的是调控亚基,缺少它就不能形成完整的复合物;而对于调控亚基来说,控制它何时被转录、何时被磷酸化、何时被降解的一整套基因更重要。因而可以推断调控亚基及其控制系统是共进化的。这是一个很有趣的事情。

这又使我想到了过去一直考虑的结构进化的问题,一个分子的进化导致起结构的变化,而与之相互作用的分子的结构也必须变化才可以继续与其作用,这应该就是“共进化”。可是有文献说平均一个分子会与至少3个分子相互作用,分子间形成相互作用的网络,如同一台由无数零件组成的高速运转的机器,机器运转的同时一个个零件却发生着变化,最终变成了另一台看上去完全不同了的机器!

上面的比喻有些机械了,不过我觉得生命的奇妙就在于此,一切如此的精巧和出人意料,只能感叹自然的伟力!

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原核表达GST融合蛋白的一些技巧

在生物通上看到的一篇GE公司编的文章(http://www.ebiotrade.com/emgzf/GE200623/29-30.pdf),介绍了一些小技巧。

一、在培养基中加2%的葡萄糖可以抑制lac启动子引发的本底表达,而不会影响IPTG诱导的由tac启动子控制的表达。( redondoself 朋友在评论中补充:在《分子克隆实验指南》下册1219页提到:最大程度诱导lac启动子需要cAMP激活蛋白(CAP)的参与,而细胞在缺葡萄糖的培养基中生长时CAP活性很高...
这样就容易理解那个加入葡萄糖防止包涵体的方法了。

二、在提高可溶表达方面可以:

      1.20-30度诱导

      2.缩短诱导时间

      3.在菌液密度较高时短时间诱导

      4.加强通气

补充一下:生物通的编辑可够粗心的,给出的文献只有前两页,不过我分析一下链接地址,发现只要把“29-30”换成“31”就可以看到第三页了。另外,用迅雷下载工具以通配符的方式还可以下载到生物通没有提供的其他文献。

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2006年诺贝尔化学奖揭晓

今天,结构生物学的历史上又多了一枚诺贝尔奖章——美国科学家Kornberg通过一系列的转录相关复合物(RNA聚合酶II、模板DNA、合成出的mRNA、核苷酸、调控蛋白)的晶体结构从分子水平上帮助人们深入地理解真核转录的分子机制。

当然,Kornberg的贡献不仅仅是晶体结构,他花了十年时间建立了用于研究真核转录的酵母系统,优化这样一个系统是一个艰苦的过程,当如此长的时间里没有实质的进展也没法发表文章时,很多其他的研究组都放弃了,而Kornberg坚持了下来,而正是这样的系统使得真核转录的研究得以取得巨大成功,并且从中获得了一系列复合物晶体。

另外,Kornberg深厚的生化知识功底使得他不仅仅是一位优秀的晶体学家,这也是我们做结构的人需要学习的。

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2006年诺贝尔生理和医学奖揭晓

两位美国科学家(Andrew Fire 和Craig Mello)在1998年2月的《Nature》杂志上发表了关于RNAi现象(双链RNA引起的基因沉默现象)的论文。从此在生物学的基础研究和医学的基因治疗方面开拓出一个新的领域。关于获奖的详情(RNAi介绍、领奖时的演讲等)可以在诺贝尔奖的官方网站看到:http://nobelprize.org/nobel_prizes/medicine/laureates/2006/index.html

关于RNAi的工作得奖是在意料之中的,不过没想到这么快,通常关于基本理论的认定都要等很多年,而这次仅仅是8年!

记得02年在取得教师资格时我试讲的题目就是《RNA干扰》,当时觉得是蛮有趣的东西,可惜实验室不做这个方向,一直都没有真正接触到。

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